Transwell細胞培養小室是細胞遷移、侵襲、藥物轉運、細胞共培養及屏障功能研究中常用的實驗工具。
它通過半透膜將細胞培養環境進行分隔，同時允許特定分子和細胞因子進行交換，可根據實驗設計實現細胞接觸或非接觸共培養。
看似簡單的Transwell實驗，實際操作中卻有不少細節容易被忽略。
加液順序、細胞狀態、接種密度、膜面處理以及后續檢測方式，都可能影響最終結果。
下面整理4個關鍵環節，一次掌握Transwell實驗中的實用操作要點。
01｜基礎操作：加液、換液要規范
Transwell實驗通常涉及上室（Apical side）和下室（Basolateral side），不同實驗對兩側液體的處理方式有所不同。
① 換液順序不要弄反
在進行藥物轉運等實驗時，可以參考：
吸液：先下室，后上室
加液：先上室，后下室
這樣可以減少操作過程中兩側液體相互干擾的可能。
② 移液時不要碰膜
Transwell膜是細胞生長和遷移的重要界面。
加液、吸液時，槍頭應盡量保持適當距離，避免直接接觸膜面，以免造成膜損傷，影響細胞貼附及后續實驗。
③ 細胞接種后，移動培養板要平穩
細胞接種完成后，如果培養板晃動過大，培養液可能從Insert中溢出，導致細胞分布發生變化。
尤其是懸浮細胞，可能隨液體進入下室，從而干擾實驗結果。
④ 加液后別忘了檢查氣泡
加入趨化因子、染液或其他實驗液體后，建議觀察Insert底部是否存在氣泡。
氣泡可能影響細胞與膜的接觸，也可能干擾細胞培養、染色及后續檢測。
??小結：加液有順序、移液要輕柔、操作后查氣泡，這些基礎細節做好，很多實驗波動都可以提前避免。
02 細胞接種：合適的狀態比“多種一點”更重要
Transwell實驗中，細胞狀態和接種密度會直接影響遷移、侵襲及轉運結果。
?接種前保持良好細胞狀態
建議接種前細胞處于健康、生長良好的狀態，融合度一般不宜超過85%–90%。
?接種密度需要優化
不同細胞的增殖和遷移能力不同，應根據細胞類型及實驗目的進行預實驗，確定合適的接種量。
?必要時進行膜表面包被
部分細胞對培養基質有特定要求，如果實驗需要包被，Insert膜同樣需要進行相應處理。
?關注細胞傳代數
尤其是藥物轉運等實驗，應盡量保持細胞來源、培養條件和傳代范圍穩定，減少批次差異。
??小結：細胞狀態好、密度合適、條件一致，才能為后續實驗打好基礎。
03 遷移/侵襲實驗：染色、計數和讀板同樣重要
完成細胞培養后，固定、染色、去除未遷移細胞和計數都會影響最終結果。
?傳統染色計數
采用Swabbing + Staining方法時，應先去除未遷移細胞，再進行固定和染色。
常用染色方法包括：
Crystal Violet｜Hematoxylin｜Giemsa｜Wright's
可根據實驗目的選擇合適的染色方式。
?檢測時不要只看數字
如果使用熒光讀板，還應結合顯微鏡觀察，同時關注：
Receiver Plate與Insert是否匹配
讀板模式是否正確
增益等參數是否合理
陰性、陽性及實驗對照是否完整
??結果異常時，不要只懷疑細胞，也要檢查耗材、參數和實驗設計。
04 耐思Transwell細胞培養小室
針對細胞遷移、侵襲、藥物轉運、細胞共培養及屏障功能研究等實驗需求，耐思Transwell細胞培養小室提供多種規格及膜材質選擇，幫助滿足不同實驗場景。
?多種規格，靈活選擇
不同孔板規格及Insert尺寸可供選擇，可根據實驗通量、細胞數量及實驗目的進行匹配。
?多種膜材質及孔徑
根據不同實驗需求，可選擇合適的膜材質和孔徑，滿足細胞培養、遷移、侵襲及成像等實驗應用。
?適用于多種實驗
可用于：
Cell Migration｜細胞遷移
Cell Invasion｜細胞侵襲
Drug Transport｜藥物轉運
Cell Co-culture｜細胞共培養
Barrier Function｜屏障功能研究
?從基礎實驗到復雜模型
通過不同規格、膜材質及孔徑的組合，為不同細胞模型和實驗設計提供更多選擇。
從細節出發，為細胞實驗提供穩定、便捷的實驗工具。
歡迎咨詢產品規格及免費試用。
